Авторы:
Алдабекова Ж.Е., Бражникова Т.А.,Джанбрбаева М.Г.
лаборанты Ескелдинская ЦРБ
Для оценки клеточного звена местного иммунитета берут материал, содержащий в себе клетки, мазки-отпечатки, капиллярную кровь, соскобы с поверхности исследуемой области, биопсийный материал, осадок смывов. Для проведения иммуноморфологических исследований используют биопсийный материал.
Для сопоставления полученных результатов необходима стандартизация способов забора биологического материала.
Оценка клеточного представительства возможна путём изучения цитограмм (мазки-отпечатки непосредственно со слизистых оболочек или мазки из клеточных элементов промывных жидкостей).
По данным цитограмм возможно изучить количество клеточных элементов (цитоз) в мазке, их представительство (иммунные клетки — эпителиальные, нейтрофилы, лимфоциты или макрофаги), соотношение количества иммунных к эпителиальным клеткам — лейкоэпителиальный индекс. Оценивают целостность клеток, функциональную активность фагоцитов (нейтрофилов и макрофагов) путём исследования способности нейтрофилов к фагоцитозу аутофлоры (бактерий, присутствующих на слизистой оболочке носа или околоносовых пазух). Метод изучения иммуноцитограмм позволяет также оценить возможность фагоцитов завершить разрушение микроорганизмов аутофлоры. Наличие в мазках деструктированных нейтрофилов и макрофагов, содержащих в себе непереваренные микроорганизмы, служит неблагоприятным прогностическим признаком. В таком случае дефектные фагоциты разрушаются и высвобождают в окружающую среду активные инфекционные микроорганизмы.
Функциональную активность клеточных элементов носовых смывов, промывных жидкостей и слюны можно исследовать в тестах оценки фагоцитоза частиц латекса, в тесте с нитросиним тетразолием, определении миелопероксидазной активности фагоцитов, а также способности клеток к адгезии и хемотаксису.
Биопсийный материал нёбных миндалин исследуют по оценке основных представителей лимфоидного ряда (CD3* — зрелые Т-лимфоциты, CD4* — Т-хелперы, CD8* — Т-цитотоксические клетки, CD20* — В-лимфоциты, CD16* — нормальные киллерные клетки), маркёров активации (HLADR — маркёр антигенпрезентации, CD71 — рецептор к трансферрину, CD25 — рецептор к интерлейкину-2 и CD95 — маркёр апоптоза).
Для определения функциональной способности иммунокомпетентных клеток K продукции цитокинов изучают наличие mРНК цитокинов внутриклеточно и на поверхности мембран методом иммунофлюоресценции с детекцией при использовании микроскопии или проточного цитофлюориметра. Возможна оценка продуцирующей способности клеток по показателям спонтанной и индуцированной продукции цитокинов в культуральной среде методом иммуноферментного анализа.